习近平总书记在纪念五四运动100周年大会上的讲话中指出：“五四运动，孕育了以爱国、进步、民主、科学为主要内容的伟大五四精神，其核心是爱国主义。”五四运动是近代中国社会发展的分水岭，五四精神则是五四运动的灵魂，正是这种精神激励着中国勇敢而睿智地探索新的道路，走向新的征程，使得中国人的思想在中西融合的大潮中获得了巨大的升华，使得我们民族在走向现代化的征程中获得了巨大精神能量，从而胜利地实现了更新我们民族精神、更新民族命运的伟大使命。爱国是五四精神的核心，进步、民主、科学是重要内容，这四个方面共同构成了五四精神的基本内容。
爱国主义是五四精神的核心内容。在五四运动过程中，知识青年、工人大众等群体所展现出的爱国主义精神，主要以“反帝救亡”为标志。但这种爱国精神并不仅仅是对帝国主义的应激反应，更非盲目排外的狭隘民族主义。她深深地植根于晚清以来几代中国人的苦斗与反思，更受到新文化运动民主、科学等理念的直接影响。所以，五四时期的爱国精神在反帝、反侵略上不仅英勇无畏、团结果敢，而且富有策略性、组织性；同时，这种爱国精神比既往更加深沉而持久。可以说，在五四前后深化、发展的爱国精神是马克思主义在中国落地生根的一个思想背景。
五四运动的进步精神主要体现在以下两个方面：第一，从社会革命的角度来看，五四运动以彻底反帝反封建的革命性、追求救国强国真理的进步性、各族各界群众积极参与的广泛性，推动了中国社会进步，成为中国旧民主主义革命走向新民主主义革命的转折点。第二，从思想革命的角度来看，五四运动本质上就是一场具有进步精神的思想解放运动，其中蕴含的进步精神无论从运动的规模上还是思想的深度上来说都是史无前例、令人瞩目的。通过五四运动，积极进步、追求进步的思想观念开始在中国深入人心。
五四运动的民主精神，可分别从思想层面、社会层面和实践层面来加以阐述。在思想层面上，主要是在批判儒家思想的基础上，广泛传播资产阶级民主思想，致力于思想解放；在社会层面上，主要是倡导个性解放、男女平等，将妇女和无产阶级纳入民主范围，扩大了民主主体，丰富了民主内涵；在实践层面上，主要是开展反对封建专制制度和军阀统治，以及追求民主政治的实践过程。
五四运动的科学精神的基本取向有以下几点：首先，高度重视自然科学知识的学习研究；其次，重视实证、逻辑、事实根据的研究方法，反对迷信、臆断的方法；再次，把社会科学研究纳入科学的领域，认为社会发展也需要以科学理论为指导；最后，以科学理性指导人生、认识世界、改造世界。五四科学精神是近代以来中国人在学习西方的过程中的一次民族精神的升华，为爱国、进步、民主提供了合理的路径和保障。